流式細胞儀的流動室維護和保養(yǎng) 流式細胞儀使用方法
時間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點擊:

流式細胞儀(Flow cytometer)是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節(jié)分辨率為零?! ×私馊绾握_地維護和保養(yǎng)流動室,可zui大化延長流動室的性能和使用期限。而不正確的使用和維護,則可能產(chǎn)生不正確的讀數(shù)和數(shù)據(jù),而且會使得你不停呼叫工程師甚至更換流動室或光路?! ∫弧⑿璞苊獾幕瘜W物質(zhì) 目前大部分流動室都是由石英或熔融石英制作而成,故需避免pH值大于9.5的堿性溶液非常重要。這些溶液可能腐蝕石英,使其變毛糙,影響光學性能。一旦使用過堿性溶液,在流動室的通路上可能會看到一些被腐蝕的條紋,如果這些條紋剛好位于激光器檢測點,那么就可能影響檢測準確性。 二、如何避免結(jié)晶 避免結(jié)晶很重要。為了避免流動室內(nèi)液體結(jié)晶,需經(jīng)常用水沖洗。在跑完緩沖液或生理鹽水之后,尤其是高pH值的溶液后,**沖洗**必要。有些流動室內(nèi)部會包被一些特殊材料,以防止**或結(jié)晶生長?! ∪?、清洗 清洗流動室和光路連接器對于**流式細胞儀的正確運行都**重要。其中zui重要的一點就是別讓流動室的液體干掉,而含有鹽分、蛋白或其它固態(tài)溶解物的液體,均可能損傷液路。 的清潔方式就是用充滿10%表面活性劑的針頭連接流動室,將活性劑注入流動室,多次注射后,將液體留在流動室內(nèi)至少2小時。zui后關(guān)機前,流動室必須**用蒸餾水充滿?! ∪绻鲃邮抑皇沁^夜,第二天馬上就用,那么可以用buffer充?! ∪绻^一個周末或長時間不用,那么建議使用蒸餾水或20%乙醇充。 四、操作和使用中的注意事項 1.光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強的光線下以后,需要較長時間的“暗適應(yīng)”以**或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽; 2.光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常; 3.液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、**; 4.注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等; 5.特別強度每次測量都需要對照組。
流式細胞儀的發(fā)展歷史
1、1934年,Moldavan使懸浮的紅細胞從一個毛細玻璃管中流過,每個通過的細胞可被一個光電裝置記錄下來。這就是流式細胞儀的雛形?! ?、1965年,Kamentsky用紫外吸收和可見光散射兩個參數(shù)同時測量未染色細胞,給出細胞中核酸的含量和細胞大小。奠定了多參數(shù)流式細胞測量的基礎(chǔ)?! ?、1967年,Van Dilla和Los Alamos采用了層流流動室和氬激光器,開發(fā)出了液流束、照明光軸、檢測系統(tǒng)三者相互垂直的流式細胞儀。這成為目前各種流式細胞儀的基礎(chǔ)?! ?、1969年,F(xiàn)ulwyler利用靜電墨水噴射液滴偏轉(zhuǎn)技術(shù),建立了流式細胞分選術(shù)。Ehrlich和Wheeless利用飛點掃描技術(shù)和縫掃描技術(shù)使零分辨率的流式細胞儀變成了低分辨率的流式細胞儀?! ?、20世紀70年代,隨著Kohler和Milstein成功提出了單克隆抗體技術(shù)和熒光標記技術(shù),為特異研究和分析細胞奠定了良好的基礎(chǔ)?! ?、1973年,美國BD公司和美國斯坦福大學合作,研制開發(fā)并生產(chǎn)了世界上**臺商用流式細胞儀FACS I?! ?、20世紀80年代,流式細胞儀的數(shù)據(jù)采集、存儲、顯示、分析日趨完善,隨著樣品制備方法的增加,新的熒光染料和細胞標記物的出現(xiàn),使流式細胞儀的應(yīng)用范圍逐漸擴大?! ?、20世紀90年代,與之配套的標本制備儀和自動進樣器的問世,以及適合臨床應(yīng)用的單克隆抗體的增加,使流式細胞儀逐漸從科研單位進入醫(yī)院的**實驗室和檢驗科,成為現(xiàn)代化的臨床檢驗儀器的一部分。