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液相色譜出現峰展寬故障的解決方法及技術交流

時間:2023-01-16 09:30:02 作者:河北航信儀器 點擊:

故障現象:

  峰展寬

  可能的原因:

  (1)進樣體積過大

  (2) 柱外體積過大

  (3) 流動相粘度過高

  (4) 保留時間過長

  (5)樣品超載

  (6)緩沖液溶度太低

  (7)保護柱污染或失效

  (8)色譜柱污染或失效,柱效太低

  (9)呈現兩個或多個未被**分離的峰

  (10)柱溫過低

YL9100液相色譜儀

  排除方法:

  (1)減小進樣體積

  (2)檢查各接頭處的連接,避免死體積形成

  (3)增加柱溫,采用低粘度流動相

  (4)等度洗脫時增加強溶劑濃度,或采用梯度洗脫

  (5)稀釋樣品,或采用小體積進樣

  (6)增加濃度

  (7)更換保護柱

  (8)清洗或更換色譜柱

  (9)選擇其他色譜柱改善分離效果

  (10)適當提高柱溫

------ 責任編輯:瑞利祥合--色譜儀采購顧問

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**液相色譜儀的組成及分類   一. 高壓輸液系統

  貯液裝置、高壓輸液泵、過濾器、脫氣裝置等

  1. 貯液器:貯液器用于存放溶劑。溶劑必須很純,貯液器材料要耐腐蝕,對溶劑呈惰性。貯液器應配有溶劑過濾器,以防止活動相中的顆粒進進泵內。溶劑過濾器一般用耐腐蝕的鎳合金制成,空隙大小一般為2mm。

  2. 脫氣裝置:脫氣的目的是為了防止活動相從高壓柱內流出時,開釋出氣泡進進檢測器而使噪聲劇增,甚至不能正常檢測。

  3. 高壓輸液泵 高壓輸液泵是**液相色譜儀的重要部件,是驅動溶劑和樣品通過色譜柱和檢測系統的高壓源,其性能好壞直接影響分析結果的可靠性。

  對高壓泵的基本要求是:

 ?、倭髁糠€(wěn)定;②輸出壓力高,***高輸出壓力為50Mpa;③流量范圍寬,可在0.01~10ml/min范圍任選。④耐酸、堿、緩沖液腐蝕。⑤壓力波動小。

  2. 梯度洗脫裝置 梯度洗脫是利用兩種或兩種以上的溶劑,按照**時間程序連續(xù)或階段地改變配比濃度,以達到改變活動相極性、離子強度或pH值,從而進步洗脫能力,改善分離的一種有效方法。當一個樣品混合物的容量因子是范圍很寬,用等度洗脫時間太長,且后出的峰形扁平不便檢測時,用梯度洗脫可以改善峰形、并縮短分離時間。HPLC的梯度洗脫與GC的程序升溫相似,可以縮短分析時間,進步分離效果。使所有的峰都處于***佳分離狀態(tài),而且峰形尖而窄。

液相色譜出現峰展寬故障的解決方法及技術交流(圖1)

  二. 進樣器

  進樣器一般要求密封性好,死體積小,重復性好,保證**進樣,進樣時對色譜系統的壓力和流量波動小,并便于實現自動化。

  高壓進樣閥是目前廣泛采用的一種方式。閥的種類很多,有六通閥、四通閥,雙路閥等。以六通進樣閥***為常用。

  三.分離系統

  色譜分離系統包括色譜柱、固定相和活動相。色譜柱是其核心部分,柱應具備耐高壓、耐腐蝕、抗氧化、密封不漏液和柱內死體積小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱壽命長的要求。通常采用優(yōu)質不銹鋼管制成。

  色譜柱按內徑不同可分為常規(guī)柱、快速柱和微量柱三類。

  常規(guī)分析柱柱長一般為10~25cm,內徑4 ~ 5mm,固定相顆粒直徑為 5 ~ 10 mm。為了保護分析柱不受污染,一般在分析柱前加一短柱,約數厘米長,稱為保護柱。

 ?。ㄎ⒘糠治鲋鶅葟叫∮趌 mm,凝膠色譜往內徑3~12 mm,制備往內徑較大,可達25 mm以上。)

  四. 檢測系統

  檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發(fā)光等。


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