【導讀】等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進行分離，檢測方法有染色法、掃描法和其它檢測方法。一、染

等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進行分離，檢測方法有染色法、掃描法和其它檢測方法。

一、染色法：

1、考馬斯亮藍染色法。

2、銀染色法。

3、同工酶染色法。

4、專一蛋白染色法。

5、熒光標記以及免疫法。

二、掃描法：

激光光源強度大，單色性好，掃描IEFE區(qū)帶***合適。

操作程序和條件必須嚴格相同。

三、其它檢測方法：

1、電泳轉移法。

2、雙向電泳法。

3、滴定曲線分析法。

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　　【***** 維修保養(yǎng)】長假歸來，不僅人員忙碌起來，實驗室中zui常用的色譜儀器也要進入高強度的工作狀態(tài)，在長假開始之時您是否做好了關機前的維護保養(yǎng)呢？如果沒有按照規(guī)范做好長假前的關機維護，就可能會導致儀器在節(jié)后伊始出現“長假綜合癥”。做好了這些節(jié)前的維護工作，我們在節(jié)后將會省去許多煩心事，但是對于色譜儀，我們仍然要按照以下要求來進行節(jié)后的儀器開機?！　∫合嗌V儀　　開機順序：　　1.檢查溶劑托盤托盤上的溶劑是否足量，以溶劑液面超過過輸液管過濾頭5厘米以上為宜?！　?.檢查輸液管內部有否氣泡，若有，應及時通過排液閥排出?！　?.對溶劑(針對**項看是否需要補充溶劑)和樣品進行處理，過濾，脫氣?！　?.打開主機電源，依次打開檢測器，泵A，泵B，柱箱的電源?！　?.打開電腦，開啟色譜工作站?！　?.先在工作站中開啟活塞泵，以所需的流動相平衡系統(約需30min)?！　?.打開氘燈，等待系統基線走穩(wěn)，開始進樣檢測?！　‰x子色譜儀　　開機順序：　　1、打開氮氣總閥，將分壓調至0.2Mpa，再調節(jié)離子色譜儀上的減壓表指針為3~6 psi?！　?、打開儀器電源?！　?、打開AS-DV或AS-AP電源。　　4、開啟電腦，啟動儀器控制器?！　?、雙擊桌面上的變色龍圖標進入軟件?！　?、確認儀器聯機狀態(tài)是否正常。　　氣相色譜儀　　開機順序：　　1、開機前要先打開載氣、氦氣、空氣總閥的開關，檢查二次表的壓力一般都在0.6MPa(氦氣在0.2MPa)?！　?、儀器電源開啟后要先通過自檢再打開工作站，確認每根柱子都要有流量之后再升溫做樣。　　3、氣密性檢查，如果氣路泄露，會導致儀器工作不穩(wěn)定或靈敏度下降甚至可能發(fā)生爆炸?！　?、檢測器：FID和TCD的檢測，溫度要控制在室溫10℃到339℃，控溫溫度在±0.1℃?！　?、在主機控制面板上設定檢測器溫度、汽化室溫度、柱箱溫度，被測物各組分沸點范圍較寬時，還需設定程序升溫速率，確認無誤后保存參數，開始升溫?！　?、打開氫氣發(fā)生器和純凈空氣泵的閥門，氫氣壓力調至0.3~0.4Mpa，空氣壓力調至0.3~0.5Mpa，在主機氣體流量控制面板上調節(jié)氣體流量至實驗要求；當檢測器溫度大于100℃時，按《點火》按鈕點火，并檢查點火是否成功，點火成功后，待基線走穩(wěn)，即可進樣?！　〔煌瑑x器有不同的開機注意事項，長假歸來的實驗室工作人員**要詳細了解之后再去為色譜儀開機，不過相信在看過這篇文章之后，您將對如何為色譜儀開機有了直觀的了解。

我們不應該在儀器有故障反映時才想到應該對儀器進行維護，不僅要定期有目的地做，還要樹立一個觀念 ， 維護與保養(yǎng)的一個重要作用就是保障保證一個良好的檢測狀態(tài)，確保得到準確的檢測數據 ， 影響分析儀器的可持續(xù)運行有因素主要有：

　　1.易損件清理更換不及時;

　　2.硬件使用不科學;

　　3.儀器本身選購及配置不當;

　　各種分析儀器從結構、功能、應用各方面差別**，但是經常出的問題以及維護保養(yǎng)的方向還是有**的共性。這種共性就是：“儀器本身各個固定部件很少出問題，只有使用者經常接觸到的地方才容易出故障”。

　　下面分別就氣相色譜儀的常見故障及常用維護：

安捷倫氣相色譜儀7890B

　　部分：氣相色譜儀

　　在使用氣相色譜儀時(以下主要以配有分流進樣口和氫火焰檢測器的氣相色譜儀為例)，使用者經常做的對儀器結構有改變的行為莫過于換柱了，雖然換柱和扎針一樣，都是氣相色譜工作者的基本功，但是，至少有一半的問題與之相關。

　　問題1：漏氣

　　進樣墊漏氣，接柱的固定螺絲漏氣，尤其是使用填充柱而又采用硅石墨墊更會如此。如果用橡膠圈好些，但是不需用，需要定期更換。毛細柱由于采用石墨墊圈則漏氣問題相對好些。

　　問題2：固定位置不準：

　　這是制約靈敏度的一個關鍵點。填充柱由于是剛性的，尺寸形狀固定，在換裝時，一般容易掌握。常出問題的是毛細柱，由于其本身柔性，在進樣口和檢測器內的長度**由使用者個人掌握，如果把握不準，會成為制約實驗效果的一個重要因素。不同公司儀器的裝柱尺寸是不同的，在使用不同襯管時也有很大區(qū)別。有些儀器提供了專用的測量工具，有些則沒有。

　　問題3：清理更換不及時：

　　這是硬件無故障而檢測狀態(tài)不好的主要原因，其具體表現就是污染，如，進樣口襯管及玻璃棉污染，柱內污染，檢測器污染，如果不及時更換或清洗，會造成基線不穩(wěn)，靈敏度下降等現象。

　　氣相色譜儀維修對策：

　　定期清洗，定期更換，用檢漏液測漏，是常用但不是的處理方法。我覺得，的方法是狀態(tài)監(jiān)控，時刻觀察系統狀態(tài)，發(fā)現問題馬上判斷問題再處理問題。同一臺機，同一根柱，在同流量，同柱頭壓下，應該有基本一致的信號基線和差不多的穩(wěn)定時間，儀器狀態(tài)的不同問題會有各種不同的反映。

　　例 1 ： 裝柱后，通上**的流量，柱頭壓和平時不一樣。如果柱頭壓明顯比平時高，可能是柱頭堵塞。如果低，可能是漏氣或柱斷裂，漏氣可以在關閉柱箱風扇后應該能聽到聲音，柱斷裂可以很容易看出來。

　　例 2： 流量正常，柱頭壓正常，但基線信號明顯地低且穩(wěn)定奇快。這種現象在使用毛細柱時常發(fā)生，原因多半就是噴嘴堵塞。確定是否這個原因的方法就是進空白溶劑，如果信號比平時低了很多，而且出峰時間又晚了一些，就基本就是這個原因，這時只能關機清洗。

　　例 3 ： 流量正常，柱頭壓正常，在三溫(OVEN，INJ，DET)到達設定值后，但基線信號明顯地偏高且不穩(wěn)定。這種情況多是污染。污染又分：進樣口污染，柱污染，檢測器污染。確定是哪一種故障并不容易(有時還是交叉反應)，但是處理方法卻一致：停機-清洗-升溫烤。我建議每次清洗把檢測器和進樣口都處理一下，畢竟耗時間的是降溫升溫。